重组人体干细胞因子的表达、复性、纯化及其对脐带血干细胞体外扩增作用研究
Expression, refolding, and purification of recombinant human stem cell factor and determination of its effect on ex vivo expansion of cord blood
-
摘要: 目的 对重组人体干细胞因子(rhSCF)蛋白在脐带血干细胞体外扩增中的作用进行研究.方法 通过大肠杆菌表达系统,经IPTG诱导表达获取SCF包涵体,经透析复性、纯化后获得蛋白.从脐带血中提取单核细胞(MNC),分选其中具有CD34+抗原表位的细胞,使用一定浓度的血小板生成素(TPO)、FLT -3配体(FL)及rhSCF组合对脐带血干细胞进行7d体外扩增以研究rhSCF的作用.结果 成功使用IPTG在大肠杆菌BL21诱导表达rhSCF,包涵体经复性及CM - Sepharose纯化获得高纯度的rhSCF.干细胞体外扩增实验表明rhSCF、FL及TPO联用,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用.结论 成功建立rhSCF原核表达、复性和纯化体系,为造血干细胞体外扩增体系的优化研究奠定了基础,同时为干细胞因子的临床应用提供了有价值的参考.