Expressions and significance of microRNA-126 and vascular endothelial growth factor in epiretinal membrane of patients with proliferative diabetic retinopathy
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摘要:目的 探讨微小RNA-126(miR-126)和血管内皮生长因子(VEGF)在增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)患者视网膜前膜组织中的表达及临床意义。方法 选取眼科择期行玻璃体切割手术的PDR患者65例纳入研究组, 另选取同期行玻璃体切割手术的特发性黄斑裂孔患者62例纳入对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测2组患者视网膜前膜组织中miR-126、VEGF mRNA表达水平，采用Western blotting法检测VEGF蛋白表达水平，检测患者空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平，采用Pearson相关分析法分析miR-126与VEGF mRNA的相关性及两者与FGB、HbA1c、TG的相关性，并对PDR发生的影响因素进行Logistic多元回归分析。结果 研究组患者视网膜前膜组织中miR-126表达水平低于对照组, VEGF mRNA及其蛋白表达水平高于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05); 研究组患者FBG、TG和HbA1c水平均高于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05); miR-126与VEGF mRNA呈显著负相关(P < 0.05); miR-126与FGB、HbA1c、TG呈显著负相关(P < 0.05), 而VEGF mRNA与FGB、HbA1c、TG呈显著正相关(P < 0.05); Logistic多元回归分析显示, miR-126与VEGF mRNA表达水平均是患者发生PDR的独立影响因素。结论 PDR患者视网膜前膜组织中miR-126表达显著降低, VEGF表达显著升高, miR-126可能通过负性调控VEGF表达而参与PDR的发生发展。Abstract:Objective To investigate expressions of microRNA-126(miR-126) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the epiretinal membrane tissues of patients with proliferative diabetic retinopathy (PDR) and their clinical significance.Methods A total of 65 patients with PDR who underwent elective vitrectomy were selected as study group, and 62 patients with idiopathic macular hole who underwent vitrectomy at the same time were selected as control group. Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction(qRT-PCR) was used to detect the expression levels of miR-126 and VEGF mRNA in the epiretinal membrane tissues of the two groups; western blotting assay was used to detect the expression level of VEGF protein; fasting blood glucose (FBG), triglyceride (TG) and glycosylated hemoglobin (HbA1c) levels were detected; Pearson correlation analysis was used to analyze the correlation between miR-126 and VEGF mRNA and their correlations with FGB, HbA1c and TG were analyzed; Logistic multiple regression analysis was used to analyze the influencing factors for the occurrence of PDR.Results The expression level of miR-126 in the epiretinal membrane of patients in the study group was significantly lower than that in the control group, VEGF mRNA and protein expression levels in the study group were significantly higher than those in the control group (P < 0.05). The levels of FGB, TG and HbA1c in the study group were significantly higher than those in the control group (P < 0.05). There were negative correlations of miR-126 with VEGF mRNA, FGB, HbA1c and TG (P < 0.05), and VEGF mRNA was positively correlated with FGB, HbA1c and TG (P < 0.05). Logistic multiple regression analysis showed that both miR-126 and VEGF mRNA were independent influencing factors for PDR in patients.Conclusion The expression of miR-126 is decreased in the epiretinal membrane tissues of PDR patients, while the expression of VEGF is significantly increased. Therefore, miR-126 may be involved in the development and progression of PDR through negative regulation of VEGF expression.
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肠镜检查是指经由患者的肛门将肠镜循腔插至其回盲部，从黏膜侧对结肠部位进行观察，及时发现病灶，是临床确诊大肠黏膜病变的最佳检查手段[1]。随着医疗技术的快速发展，肠镜检查已经从普通肠镜发展至无痛肠镜。然而，无痛肠镜、普通肠镜均存在着一定的引发肠穿孔风险，尤其是当前肠道肿瘤、肠道疾病发病率的逐年升高，由肠镜检查所致的肠穿孔更是引起了临床的高度重视[2]。本研究比较无痛肠镜与普通肠镜对肠穿孔发生率的影响，现报告如下。
1. 资料与方法
1.1 一般资料
采用掷硬币法将2018年1—12月本院行肠镜检查的116例患者分为观察组(无痛肠镜检查)与对照组(普通肠镜检查)，每组58例。对照组中男34例，女24例; 年龄38~68岁，平均(53.48±1.12)岁; 病症类型: 结肠炎24例，结肠息肉20例，结肠癌14例; 病程3个月~5年，平均(2.33±0.21)年。观察组中男37例，女21例; 年龄40~66岁，平均(53.45±1.17)岁; 病症类型: 结肠炎27例，结肠息肉21例，结肠癌10例; 病程4个月~5.5年，平均(2.37±0.20)年。纳入标准: ①均需行肠镜检查者; ②依从性好，能够配合肠镜检查者; ③非妊娠期的女性肠道疾病患者。排除标准: ①肛门和(或)直肠存在严重的化脓性炎病(肛周脓肿、疼痛性病灶)者; ②急性肠炎或放射性结肠炎、细菌性痢疾活动期者; ③重度高血压、高龄、身体极度衰弱者。2组患者一般资料无显著差异。
1.2 方法
在实施肠镜检查前, 2组患者均需要按照医嘱要求禁食、禁水6~8 h以上，常规行肠道清洁。观察组实施无痛肠镜检查，常规检测生命体征指标后，经由鼻导管的方式叮嘱患者吸氧，麻醉医师按照0.001 mg/kg将枸橼酸芬太尼注射液(宜昌人福药业有限责任公司，国药准字H42022076)缓慢静脉推注，同时按照2.0 mg/kg匀速静脉推注丙泊酚注射液(Corden Pharma S. P. A, 进口药品注册证号H20100646)。如有必要，可采取静脉推注的方式注入0.5 mg硫酸阿托品注射液(北京双鹤药业股份有限公司，国药准字H11020766)。当患者完全进入睡眠状态、睫毛反射消失后，实施无痛肠镜检查[3]。仪器设备为日本奥林巴斯OLYMPUS医疗株式会社生产的CV170电子胃肠镜系统。进入患者肠腔后，利用内镜送水泵注36 ℃温水以获取清晰的视野。经由患者肠腔进镜约40 cm后打开内镜主机的注气泵，于一旁的显示器中仔细观察肠道内部结构。
对照组采取普通肠镜检查，检查前步骤同观察组。在检查时不使用任何药物，仪器设备同为CV170电子胃肠镜系统，将带有摄像镜头的细管经由患者肛门部位缓慢插入肠道，插入过程中采取注气的方式充分扩张其肠道，以便于肠镜能够顺利进入。在插入过程中，患者会存在明显的胀痛感，此时操作人员积极与患者进行语言交流以分散其注意力。当肠镜抵达检查部位时，旋转镜头仔细对肠道进行观察，确定病变部位以及病变严重程度。
1.3 观察指标
选取生命体征指标、操作时间、满意度、肠穿孔发生率作为两种肠镜检查方式应用效果的评价指标。生命体征指标包括收缩压、舒张压、心率、血氧饱和度; 肠穿孔部位包括直肠、乙状结肠、其他部位，发生率为各部位肠穿孔例数之和与患者总数的百分比; 满意度采用满意、一般、不满意3级评定。
1.4 统计学方法
采用SPSS 22.0统计软件进行数据处理，计量资料采用均数±标准差(x±s)表示，行t检验，计数资料采用率(%)表示，行χ2检验，等级资料行Z检验, P < 0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
检查前, 2组患者生命体征指标、血氧饱和度差异无统计学意义(P>0.05); 检查中，观察组生命体征指标均显著低于对照组(P < 0.05), 而血氧饱和度、操作时间的差异无统计学意义(P>0.05), 见表 1。观察组肠穿孔发生率显著高于对照组(P < 0.05), 见表 2。观察组满意度较对照组更高，差异有统计学意义(P < 0.05), 见表 3。
表 1 2组生命体征指标、血氧饱和度、操作时间比较(x±s)组别 收缩压/mmHg 舒张压/mmHg 心率/(次/min) 血氧饱和度/% 操作时间/min 检查前 检查中 检查前 检查中 检查前 检查中 检查前 检查中 观察组(n=58) 122.75±1.25 125.80±1.32* 75.38±1.12 77.64±1.06* 78.50±1.50 80.00±1.00* 96.38±1.12 95.88±1.02 12.85±1.15 对照组(n=58) 122.80±1.28 136.54±1.36 75.42±1.15 83.28±1.02 79.00±1.00 92.50±1.50 96.45±1.15 95.80±1.04 12.93±1.18 与对照组比较, *P < 0.05。 表 2 2组肠穿孔发生率比较[n(%)]组别 n 直肠 乙状结肠 其他部位 合计 对照组 58 1(1.72) 1(1.72) 0 2(3.44) 观察组 58 2(3.45) 4(6.90) 1(1.72) 7(12.07)* 与对照组比较, *P < 0.05。 表 3 2组满意度比较组别 n 满意 一般 不满意 总满意度/% 对照组 58 48 7 3 94.83 观察组 58 54 4 0 100.00* 与对照组比较, *P < 0.05。 3. 讨论
在所有肠道疾病中，肠癌是较为常见的恶性病变，不仅严重影响其身心健康，还会对其生命安全带来威胁，所以及早诊断、及早治疗尤为重要[4]。肠镜检查是当前临床确诊肠道疾病的首选手段，随着医疗产业的快速发展，高分辨率及高清晰度的肠镜系统可大幅提高肠道疾病检出率，特别是无痛肠镜的出现更是使得患者身心体验舒适度大幅提高[5]。然而，无痛肠镜、普通肠镜均属于侵入式检查，均需要将肠镜经由患者肛门循腔插至回盲部，在插入过程中不可避免地会对患者肠壁造成一定程度的医源性损伤[6]。
肠穿孔为肠镜检查中较为常见的并发症之一，现有研究[7]指出，该并发症多发生于年老体弱、患有肠道系统疾病(结肠炎、结肠息肉、结肠癌等)的患者群体。肠道穿孔的发生部位以直肠、乙状结肠多见，结肠其他部位相对少见[8-9]。在肠镜检查中引发肠穿孔的因素则包括生理因素以及操作因素，生理因素为直肠及乙状结肠的肠管较为狭窄且肠壁更薄，特别是乙状结肠和降结肠的移行部结肠系膜相对较长，使得此部位的肠管冗余和迂曲，在肠镜插入此段时因肠管呈“N”“P”或“a”形，不仅通过难度大幅增加，肠镜镜头还会导致肠壁受到的直接作用力以及肠管压力随之增加[110-11]。
操作因素则包括: 医务人员肠镜检查经验不足或者是肠镜插入过程中动作粗暴，并未严格遵循“循腔进镜”的操作原则，在未见到肠腔的情况下盲目插镜或者是滑镜，导致镜端直接对肠壁形成损伤而诱发穿孔，亦或是镜身于患者的肠腔内结襻，结肠在过度伸长之下引发撕裂穿孔; “U”形倒镜对肛周病变进行观察时，不注意加大注气量以充分扩张患者的壶腹部，或者是盲目地旋转镜头以获取更佳的视野，导致镜端顶住了患者的肠壁，形成穿孔; 无痛肠镜检查时患者对于腹胀、腹痛缺乏应激性反应，造成其肠腔内存在过度注气情形，肠黏膜在压力过大之下发生撕裂穿孔[12-13]。
本研究证实，实施无痛肠镜检查的观察组生命体征指标中收缩压、舒张压、心率均较同期行普通肠镜检查的对照组显著更低(P < 0.05), 观察组满意度及肠穿孔发生率均显著高于对照组(P < 0.05)。需要注意的是，无痛肠镜所致的肠穿孔发生率高于普通肠镜，原因为无痛肠镜检查时所使用的麻醉药物大幅降低了患者的感知系统能力，使得肠穿孔风险进一步升高[14]。
综上所述，无痛肠镜在临床应用期间对患者生命体征指标的影响较普通肠镜更小，满意度更高，但肠穿孔发生率高于普通肠镜，二者各具优势，临床可根据患者意愿加以使用。
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表 1 qRT-PCR引物序列
基因 正向引物 反向引物 miR-126 5′-GTCTCGTACCGTGAGTAAT-3′ 5′-GTGCAGGGTCCGAGGT-3′ U6 5′-ATTGGAACGATACAGAGAAGATT-3′ 5′-GGAACGCTTCACGAATTTG-3′ VEGF mRNA 5′-GAGCCTTGCCTTGCTGCTGCTCTA-3′ 5′-CACCAGGGTCTCGATTGGATG-3′ β-actin 5′-TGCTGTCCCTGTATGCCTCT-3′ 5′-TGATGTCACGCACGATTT-3′ 
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表 2 2组视网膜前膜组织中miR-126、VEGF mRNA和VEGF蛋白表达水平比较(x±s)
组别 n miR-126 VEGF mRNA VEGF蛋白 对照组 62 0.98±0.16 1.02±0.17 0.62±0.10 研究组 65 0.42±0.07* 4.35±0.41* 0.92±0.11* miR-126: 微小RNA-126; VEGF: 血管内皮生长因子。与对照组比较, *P < 0.05。
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表 3 2组FGB、TG及HbA1c水平比较(x±s)
组别 n FGB/(mmol/L) HbA1c/% TG/(mmol/L) 对照组 62 5.02±0.83 6.11±1.02 1.42±0.24 研究组 65 8.34±1.32* 13.19±1.12* 1.72±0.18* FBG: 空腹血糖; HbA1c: 糖化血红蛋白; TG: 甘油三脂。与对照组比较, * P < 0.05。
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表 4 miR-126、VEGF mRNA与患者临床指标的相关性分析
指标 miR-126 VEGF mRNA r P r P FGB -0.512 < 0.01 0.612 < 0.01 HbA1c -0.458 < 0.01 0.522 < 0.01 TG -0.352 < 0.01 0.473 < 0.01 miR-126: 微小RNA-126; VEGF: 血管内皮生长因子;
FBG: 空腹血糖; HbA1c: 糖化血红蛋白; TG: 甘油三脂。
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表 5 PDR影响因素的Logistic单因素分析
因素 β SE Wald P OR 95%CI 年龄 0.357 0.223 2.563 0.087 1.429 1.012~2.018 性别 0.368 0.215 2.935 0.068 1.445 1.023~2.042 病程 0.387 0.231 2.812 0.072 1.473 1.027~2.113 FGB 0.467 0.211 4.899 0.023 1.595 1.127~2.258 HbA1c 0.547 0.212 6.669 0.012 1.729 1.347~2.219 TG 0.494 0.201 6.037 0.035 1.639 1.324~2.028 miR-126 1.123 0.396 8.048 0.001 3.075 2.245~4.213 VEGF mRNA 1.012 0.412 6.031 0.015 2.750 2.109~3.587
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表 6 qPDR影响因素的Logistic多因素分析
因素 β SE Wald P OR 95%CI FGB 0.526 0.314 2.806 0.075 1.692 1.221~2.345 HbA1c 0.523 0.311 2.829 0.073 1.687 1.213~2.347 TG 0.573 0.302 3.603 0.065 1.774 1.302~2.417 miR-126 0.755 0.317 5.667 0.025 2.127 1.679~2.694 VEGF mRNA 0.786 0.334 5.541 0.027 2.195 1.702~2.831
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[1] SABANAYAGAM C, BANU R, CHEE M L, et al. Incidence and progression of diabetic retinopathy: a systematic review[J]. Lancet Diabetes Endocrinol, 2019, 7(2): 140-149. doi: 10.1016/S2213-8587(18)30128-1
[2] 谭建成, 刘鑫国, 邢金燕. miR-429在鼻咽癌细胞中的表达及其对细胞增殖、迁移的影响[J]. 现代肿瘤医学, 2021, 29(9): 1501-1506. doi: 10.3969/j.issn.1672-4992.2021.09.007 [3] MARTINEZ B, PEPLOW P V. microRNAs as biomarkers of diabetic retinopathy and disease progression[J]. Neural Regen Res, 2019, 14(11): 1858-1869. doi: 10.4103/1673-5374.259602
[4] 常占国, 张晓冬, 袁博, 等. miR-155和TGFβR2在结肠癌中的表达及临床意义[J]. 现代肿瘤医学, 2020, 28(12): 2107-2112. doi: 10.3969/j.issn.1672-4992.2020.12.025 [5] 闫配, 张晓红, 张莉, 等. HMW-ADP、TNF-α、VEGF与糖尿病视网膜病变的关系研究[J]. 中国医药导报, 2019, 16(9): 106-109. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YYCY201909028.htm [6] 彭程, 黄健华, 孙建忠, 等. miR-126对急性脊髓损伤大鼠血管的作用及机制研究[J]. 国际骨科学杂志, 2020, 41(6): 382-388. doi: 10.3969/j.issn.1673-7083.2020.06.013 [7] 邵毅, 周琼. 糖尿病视网膜病变诊治规范: 2018年美国眼科学会临床指南解读[J]. 眼科新进展, 2019, 39(6): 501-506. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-XKJZ201906002.htm [8] 隋文婕, 张晶晶, 汤庆丽, 等. lncRNA PVT1及miR-26b在增生型糖尿病视网膜病变患眼玻璃体、增生膜中的表达研究[J]. 临床眼科杂志, 2020, 28(4): 289-293. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-LCYZ202004001.htm [9] AOUISS A, ANKA IDRISSI D, KABINE M, et al. Update of inflammatory proliferative retinopathy: ischemia, hypoxia and angiogenesis[J]. Curr Res Transl Med, 2019, 67(2): 62-71. doi: 10.1016/j.retram.2019.01.005
[10] 董天慧, 孙建梅, 姚舜, 等. 波动性高糖对糖尿病视网膜病变的作用研究进展[J]. 安徽医药, 2019, 23(8): 1485-1488. doi: 10.3969/j.issn.1009-6469.2019.08.001 [11] YANG Y, LIU Y, LI Y P, et al. microRNA-15b targets VEGF and inhibits angiogenesis in proliferative diabetic retinopathy[J]. J Clin Endocrinol Metab, 2020, 105(11): 3404-3415. doi: 10.1210/clinem/dgaa538
[12] ALHASAN L. miR-126 modulates angiogenesis in breast cancer by targeting VEGF-A-mRNA[J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2019, 20(1): 193-197. doi: 10.31557/APJCP.2019.20.1.193
[13] LI S N, LI P, LIU W H, et al. Danhong injection enhances angiogenesis after myocardial infarction by activating miR-126/ERK/VEGF pathway[J]. Biomed Pharmacother, 2019, 120: 109538. doi: 10.1016/j.biopha.2019.109538
[14] 施凤涟, 司焕焕, 黄杰. 妊娠期糖尿病患者血清miR-126表达与胰岛素抵抗的关系[J]. 中国糖尿病杂志, 2020, 28(6): 423-427. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZGTL202006005.htm [15] ZHENG Y, LIU Y, WANG L, et al. microRNA-126 suppresses the proliferation and migration of endothelial cells in experimental diabetic retinopathy by targeting polo-like kinase 4[J]. Int J Mol Med, 2021, 47(1): 151-160.
[16] 毛永, 吴娟, 刘向玲, 等. 外周血单个核细胞血清γ干扰素水平与糖尿病视网膜病变的相关性[J]. 广东医学, 2020, 41(1): 72-76. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-GAYX202001016.htm [17] 郭永华, 乔瑞娟, 张玲. 血清脂类物质、胱抑素C、同型半胱氨酸在糖尿病视网膜病变中的临床意义[J]. 检验医学与临床, 2020, 17(2): 256-258. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-JYYL202002036.htm [18] DU E M, LI X, HE S Y, et al. The critical role of the interplays of EphrinB2/EphB4 and VEGF in the induction of angiogenesis[J]. Mol Biol Rep, 2020, 47(6): 4681-4690. doi: 10.1007/s11033-020-05470-y?utm_content=null&utm_medium=cpc&utm_source=trendmd
[19] ZHOU W, WU Y, PAN M, et al. Proliferation and migration of lung cancer could be inhibited by oxymatrine through the regulation for miR-520/VEGF[J]. Am J Chin Med, 2019, 47(4): 865-878. doi: 10.1142/S0192415X19500459
[20] 李开元, 艾明. 血清ICAM-1、VEGF水平与老年糖尿病视网膜病变患者微血管损伤的相关性研究[J]. 中华保健医学杂志, 2019, 21(1): 39-41. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-JFJB201901038.htm -
期刊类型引用(2)
1. 胡兰，谢晨栖，贾萍. 狼疮性肾炎免疫机制及治疗新进展. 现代医药卫生. 2024(12): 2109-2113+2117 . 
百度学术
2. 朱红红，马中双，刘颖. 狼疮性肾炎患者外周血炎症和免疫调节相关分子水平变化及其预测预后的价值. 实用临床医药杂志. 2024(24): 110-115+120 . 本站查看
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