干扰表皮生长因子受体表达对脑出血后星形胶质细胞活化的影响及其机制

Effects of EGFR interference on activation of astrocytes after intra-cerebral hemorrhage and its mechanism

  • 摘要: 目的 观察干扰表皮生长因子受体(EGFR)表达对脑出血后星形胶质细胞活化的影响.方法 注射Ⅶ型胶原酶制备脑出血模型大鼠,同时设置假手术组作为对照.术后7d,行神经功能评分判断造模成功与否.取脑出血模型大鼠和假手术大鼠,行SP免疫组化法检测脑组织EGFR和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达.分离新生大鼠皮层星形胶质细胞,体外培养.观察干扰EGFR表达对细胞的影响,实验分4组:① 对照组:不处理;② 重组大鼠睫状神经营养因子(CNTF)组:加入20 μg/L CNTF;③ 阴性组:加入20 μg/L CNTF,并转染EGFR siRNA阴性对照;④ EGFR组:加入20 μg/L CNTF,并转染EGFR siRNA.采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组细胞EGFR、GFAP、磷酸化酪胺酸激酶JAK1(p-JAK1)、磷酸化信号传导与转录激活因子3(p-STAT3)的表达.结果 脑出血模型大鼠造模成功率89.5%(17/19).脑出血模型大鼠脑组织EGFR和GFAP表达显著高于假手术组(P<0.05).EGFR组EGFR mRNA和蛋白相对表达量显著低于对照组、CNTF组和阴性组(P<0.05).CNTF组和阴性组GFAP mRNA和蛋白相对表达量显著高于对照组和EGFR组(P<0.05),而对照组和EGFR组比较无显著差异(P>0.05).CNTF组和阴性组p-JAK1和p-STAT3蛋白相对表达量显著高于对照组和EGFR组(P<0.05),而对照组和EGFR组比较无显著差异(P>0.05).结论 脑出血大鼠EGFR和GFAP表达升高,星形胶质细胞活化.干扰EGFR表达可抑制大鼠星形胶质细胞活化,其机制可能与阻滞JAK1和STAT3磷酸化有关.

     

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