摘要: 目的 制备抗人宫颈癌癌基因(HCCR)单克隆抗体(mAb),并进行鉴定.方法 以HCCR重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,常规筛选杂交瘤细胞.腹水诱导法制备抗人HCCR单克隆抗体,并经蛋白A亲合层析进行纯化.用Westem blot和免疫荧光等方法检测HCCR mAb的特异性.用纯化HCCR蛋白进行包被,建立间接ELISA方法,检测系列稀释的HCCR mAb,确定其灵敏度.结果 筛选出2株分泌抗人HCCR mAb的杂交瘤细胞株.Western blot结果表明抗人HCCR抗体能与HCCR蛋白特异性结合,免疫荧光结果显示肝癌HepG2细胞中胞浆和胞膜均呈阳性染色.间接ELISA方法检测HCCRmAb的灵敏度可达到1μg/L.结论 成功制备并鉴定了特异性抗人HCCRmAb的杂交瘤细胞株,为进一步深入研究HCCR的生物学特征和临床应用打下基础.