摘要: 目的 观察慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长的影响.方法 将pRNAT-shSTAT3重组慢病毒质粒进行包装产生病毒液,测定其滴度,感染大肠癌HT-29细胞,筛选获得阳性细胞株,实时定量PCR和Western blot 检测shRNA对STAT3基因的沉默效率, MTT法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 成功包装慢病毒,其病毒悬液的滴度为2×107 TU/mL.病毒液感染大肠癌HT-29细胞,经G418筛选获得稳定细胞株,实时定量PCR和Western blot结果分别显示HT-29细胞STAT3mRNA表达和蛋白明显减弱,表达量分别为(16.9±2.1)%、(18.8±2.4)%(P＜0.01).MTT结果显示STAT3基因沉默后的大肠癌HT-29细胞生长明显减慢, G0/G1期细胞占(68.73±2.88)%, S期细胞占22.93±1.10%, 与对照组相比差异显著(P＜0.01).结论 慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长有明显的影响,细胞生长速度明显减慢,细胞阻滞于G0/G1期.