摘要:
目的 检测小型猪骨髓、肾上腺、肾、脾、肝和骨骼肌中,SCF、IL-3、IL-6、GM-CSF和EPO等关键造血因子的表达水平,为小型猪造血相关研究提供实验基础.方法 ①取小型猪骨髓、肾上腺、肾、脾、肝和骨骼肌,经无菌处理后,按1∶9比例将组织块和含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液加入培养瓶,37 ℃、5% CO2培养5 h,收集上层培养液;②在肾组织培养瓶中补充培养液,培养至24 h、96 h,分别收集上层培养液;③用定量ELISA检测培养液中SCF、IL-3、IL-6、GM-CSF和EPO含量.结果 ①培养5 h,SCF、IL-3、IL-6、GM-CSF、EPO 5种造血因子含量在骨髓培养液中分别为14.25、8.67、0、5.69、16.00 IU/L;在肾上腺培养液中分别为19.96、30.67、7.00、8.45、5.57 IU/L;在肾培养液中分别为53.00、98.67、107.96 、34.48、63.83 IU/L;在脾培养液中分别为15.67、4.67、0、4.31、9.91 IU/L;在肝培养液中分别为24.96、36.67、29.86、12.93、28.61 IU/L;在骨骼肌培养液中分别为17.82、14.67、42.71、9.12、21.65 IU/L;②肾组织培养24 h: SCF 147.61 ng/L、IL-3 298.67 ng/L、IL-6 385.44 ng/L、GM-CSF 91.55 ng/L、EPO 158.09 IU/L;肾组织培养96 h: SCF 142.96 ng/L、IL-3 295.34 ng/L、IL-6 249.72 ng/L、GM-CSF 126.72 ng/L、EPO 148.96 IU/L.结论 ①小型猪肾组织培养液中各造血因子浓度均为最高,其次为肝和骨骼肌.②以上细胞因子在肾组织原代培养中持续表达,除GM-CSF浓度一直呈上升趋势外,其它4种细胞因子浓度均在第24 h达到最高.